凍結乾燥または凍結乾燥は、短時間の実験手順である
凍結乾燥の基本
細菌、真菌、酵母または他の微生物の培養物を長期間保存する最良の方法の1つは、凍結乾燥のプロセスを用いることである。 この短時間の実験手順は、市販されている凍結乾燥機を使用して培養コレクションを保存することができます。 凍結乾燥は最も複雑で高価な乾燥方法であるため、通常、プロセスは高価な繊細で熱に弱い物質に限定されています。 凍結により損傷を受けていない物質は、通常、凍結乾燥されて、冷蔵保存が不要となる。
このプロセスは、培養時間を含まず、わずか3時間、24時間もかかることがあります。
凍結乾燥のステップバイステップのプロセス
まず、LBまたは他の適切な栄養寒天プレート上で微生物の一晩の培養物または芝生を生育させる。
次に、キャップ（ラバーストッパー）をゆるやかに上にして、オートクレーブで滅菌クリンプキャップバイアルを準備します。 オートクレーブする前に、チューブの内側に培養液の識別情報が印刷された紙ラベルを置きます。 あるいは、 滅菌用に設計されたキャップ付きチューブを使用してください。
4mLの凍結乾燥バッファーをプレートに添加する。 必要であれば、無菌ガラス棒を用いて細胞を懸濁させることができる。
培養懸濁液を素早く滅菌バイアルに移す。 バイアルあたり約1.5mLを加える。 ゴムキャップでシールしてください。
バイアルを-20度Celciusフリーザーに入れてバイアル内の培養懸濁液を凍結します。
培養物が凍結したら、凍結乾燥機をオンにして、適切な温度および真空条件が安定するまで時間をおいて準備する。 これは、使用しているフリーズドライヤーの特定ブランドのメーカーの指示に従って行います。
凍結乾燥プロセス中に水分が逃げるように注意深く無菌的にバイアルキャップをバイアルの上にゆっくりと置き、バイアルをフリーズドライヤーチャンバーに入れます。 製造業者の指示に従って、チャンバーに真空を適用する。
培養時間を完全に凍結乾燥させる（乾燥させる）。 これには、各サンプルの量とサンプル数に応じて、数時間から一晩かかる場合があります。
メーカーの指示に従って凍結乾燥機チャンバーからサンプルを取り出し、直ちにラバーキャップ、クリンプトップでバイアルを密閉します。
凍結乾燥した培養液を室温で保存する。
必要な製品
- 凍結乾燥機
- 栄養素または他の適切な寒天プレート（および培養を培養するインキュベーター）
- ガラス棒
- 凍結乾燥用緩衝液
- ゴム栓が付いたクリンプトップバイアル（およびキャップのクリンパー）
- 冷凍庫
参照：
SP Scientific。 凍結乾燥の基本原則。 http://www.spscientific.com/freeze-drying-lyophilization-basics/