RFLP分析とも呼ばれるこの技術は、個々の人々の遺伝子コードにおける多型を利用する。 種のすべてのメンバーが本質的に同じ遺伝的構成を有するにもかかわらず、これらのわずかな違いは、個体間の出現または代謝などの表現型の変動を説明する。
RFLP：分析手法とアプリケーション
RFLP分析技術は、既知の可変性を有するDNAの特定の領域を制限酵素で切断し、次いでアガロースゲル電気泳動によってDNA断片を分離し、断片数および相対的な大きさを決定することを含む。
制限酵素は酵素であり、制限酵素部位でDNAを切断するタンパク質分子である。 本質的に、DNAサンプルは、切断され、制限酵素によって消化される。 得られたフラグメントは、その長さに従って分離され、フラグメントサイズのパターンは、試験される個体ごとに異なる。
完全なRFLPプロセスは、プローブ標識、DNA断片化、電気泳動、ブロッティング、ハイブリダイゼーション、洗浄、およびオートラジオグラフィーを必要とする。 検出されたRFLPは、オートラジオグラフィーでX線フィルムを用いて視覚化され、ここで、DNA断片は、電気泳動によって互いに分離された後に見られ、分析され得る。
RFLP分析のアプリケーションには、次のものがあります。
- DNAフィンガープリンティング 。 法医学者は、RFLP分析を使用して、犯罪の場面で収集された証拠サンプルに基づいて容疑者を特定することができます。
- 父親 RFLPは父性の判定や祖先の追跡にも使用されます。
- 遺伝的多様性。 この技術は、野生生物の進化と移動の研究、動物集団における繁殖パターンの調査、特定の疾病の検出と診断に使用できます。
ゲノムの変異のRFLP検出を用いる技術は、ゲノムマッピングおよび遺伝的疾患分析における重要なツールである。 特定の疾患遺伝子の位置が特定の染色体で求められている場合、研究者はその疾患の家族のメンバーのDNAを分析し、RFLP対立遺伝子における同様の相続パターンを探す。
病気遺伝子が局在すると、他の家族のRFLP分析により、突然変異遺伝子のキャリアが明らかになり、全体的な疾患リスクが示される可能性があります。 法医学やその他の分野でDNAの分析に新しい、より堅牢な技術が使用されている現在、RFLP技術は広く使用されていないことに注意することが重要です。
分析のネガティブな側面
残念なことに、RFLP解析技術は退屈で遅い。 大量のサンプルDNAを必要とすることとは別に、サンプルは通常、DNAサンプルに対して比較的大きい4分の1のサイズである必要があります。プローブラベリングから洗浄およびオートラジオグラフィーまでのプロセスは、完了するために完全な月。
ヒトゲノムプロジェクトの結果は、RFLPの必要性をかなり置き換えました。 このプロジェクトは、ヒト細胞、ヒトゲノムに見られるDNAの全配列を決定し、ヒトゲノム中のすべての遺伝子を同定することを可能にした。